产品货号：
KM0142
中文名称：
细胞内一氧化氮荧光探针(DAF-FM DA粉末)
英文名称：
DAF-FM diacetate
产品规格：
1mg
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本产品以冻干粉形式提供，可用DMSO配制成储存液后，用适当的生理缓冲液或培养基稀释到所需工作浓度后进行探针加载。建议起始工作浓度范围是1～10μM。对于用量比较少的用户，也可直接选择我司提供的DAF-FM DA（5mM in DMSO，货号：KM0149）。
DAF-FM DA是一种细胞膜渗透性的一氧化氮（NO）荧光探针，Ex/Em=495/515nm。DAF-FM DA主动扩散穿透细胞膜，一旦进入细胞，胞内酯酶使其去乙酰化生成DAF-FM。DAF-FM本身荧光很弱，其荧光量子产率~0.005，但与NO反应后荧光增强约160倍，光量子达到~0.81。与最早的NO探针DAF-2相比，DAF-FM具有以下几个优势：
- DAF-FM与NO形成的加合物的光谱不依赖pH（＞5.5）；
- DAF-FM与NO形成的加合物的光稳定性明显强于DAF-2/NO加合物；
- DAF-FM的NO检测下限~3nM，比DAF-2灵敏度高（~5nM）。
CAS NO：254109-22-3
分子式：C25H18F2N2O7
分子量：496.42
纯度：≥98%（HPLC）
外观：浅黄色粉末
溶解性：溶于DMSO（5mM）
结构式：
保存：-20℃干燥保存，2年有效。
- BSA和酚红对DAF-FM的荧光检测有干扰，请避免体系内含有这些组分。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
一、储存液制备
- 储存液制备
取低温保存的冻干粉置于室温回温至少20min，低速离心后，加入适量体积的无水DMSO配制成一定浓度的储存液。比如，往1mgDAF-FM DA（Mw：496.42）加入402.88μL DMSO，充分溶解后配制成5mM储存液。 - 储存液保存
为了延长储存液的保存时间，需根据单次用量分装避光冻存，以最小化反复冻融次数。分装冻存的溶液至少稳定保存6个月。 - 工作液制备
于正式实验前，用合适的生理缓冲液或新鲜培养基取适量储存液稀释到工作浓度。工作液需现配现用，多余的工作液需丢弃。建议起始工作浓度范围是1～10μM。
二、操作步骤
以下操作步骤仅做参考。最佳的加载浓度、时间和温度需根据经验来调整。总的来说，以能达到检测需求的最低浓度最佳。通过降低加载温度能减缓亚细胞区室化现象。
- 细胞悬液或玻片上准备活细胞；
- 用适当缓冲液或新鲜培养基（不含血清和酚红）稀释DMSO储存液。建议起始工作浓度范围是1～10μM。
- 用稀释好的DAF-FM DA工作液孵育细胞20～60min，孵育温度为4～37℃。贴壁细胞不需消化后再加载。
- 用PBS,pH7.4充分清洗细胞直至去除多余探针。更换新鲜缓冲液或培养基再孵育15～30min，使得细胞内酯酶能将探针充分去酯化。
- 最大激发和发射波长分别是495和515nm。因这些波长与荧光素非常相似，因此，适用于荧光素或FITC的检测系统都行。
相关搜索：细胞内一氧化氮荧光探针(DAF-FM DA粉末)，DAF-FM二乙酸盐，二氨基荧光素-FM二乙酸盐，一氧化氮探针，一氧化氮荧光探针，细胞一氧化氮荧光探针，NO荧光探针，DAF-FM diacetate，254109-22-3